### 1. 单一固定液的性质和用途

#### (1) 乙醇（C2H5OH）

又名酒精，能够沉淀白蛋白、球蛋白及核蛋白。由于核蛋白溶于水，故经过酒精固定的标本在细胞核染色上效果不佳。酒精可溶解脂肪和类脂，因而不适合用来固定脂肪。尽管酒精可以沉淀肝糖，却仍可溶于水，因此固定后的肝糖不能存放在低于70％的酒精中。用于单一固定时，酒精的浓度应为95-100％。无水酒精的渗透力较差，可能导致组织收缩，当与醋酸或氯仿混合使用时，可以提高它们的穿透力。除固定外，酒精亦具有硬化和脱水功能，固定后的组织可保存于70％的酒精中，这使得酒精在制片过程中非常实用。但无水乙醇容易挥发并吸湿，需保持瓶盖紧闭，且建议在瓶内放置少量无水硫酸铜，以吸湿。此外，酒精作为还原剂，不应与重铬酸钾或锇酸等氧化剂共同使用。

#### (2) 甲醛（HCHO）

甲醛为气体，溶于水后形成福尔马林，常用的配制浓度为10%福尔马林，通常通过将10ml市售甲醛液与90ml蒸馏水混合得到，实际上含量为4%的甲醛。甲醛不能沉淀白蛋白以及核蛋白，但可以与蛋白质结合。其应用广泛，易于使用，穿透力强且固定均匀，组织收缩度小，适合一般器官组织的固定及保存，尤其对脂肪和神经组织固定效果较好。对于病理组织的制片以及大体积标本的保存，甲醛更显其优势，常需固定24小时以上，固定后的组织可以转入50%酒精中脱水。甲醛是强还原剂，需避免与其他氧化剂如铬酸、重铬酸钾等混合使用，易被氧化为甲酸。长期存储时，尤其在低温环境下，甲醛易生成多聚形式，产生白色沉淀。为了改善固定液的稳定性，可以向福尔马林中加入少量的醋酸钙、碳酸镁或大理石作为中和剂。制备10%中性甲醛溶液时，pH值应约为7.0。

#### (3) 醋酸（CH3COOH）

醋酸在低温下结成冰状，因此也被称为冰醋酸，通常与水及乙醇混合使用，推荐的浓度为0.3-5%。其优秀的能力是能有效沉淀核蛋白，并对染色质固定效果良好。醋酸的强穿透力能够使组织膨胀，常与其他药剂共同使用，以抑制组织收缩。但需注意，醋酸会破坏线粒体和高尔基体，因此在处理相关组织时不建议使用醋酸。

#### (4) 呋喃酸（C6H2(NO2)3OH）

呋喃酸是一种强酸，呈黄色结晶，能溶于水、乙醇、苯和二甲苯。由于其具有自燃和爆炸风险，因此需湿性保存。常备饱和水溶液（100ml蒸馏水加12g呋喃酸）。呋喃酸能沉淀蛋白质，对胞质的固定效果良好。虽然其穿透力较慢，且会使组织发生强烈收缩，常与醋酸等药剂联用。使用呋喃酸固定的组织可能会呈现黄色，可以用加入少量碳酸锂的低度酒精进行清洗，残留的黄色对染色并无影响。

#### (5) 重铬酸钾（K2Cr2O7）

重铬酸钾呈橙红色结晶，溶于水，属强氧化剂，与乙醇混合时存在危险。其穿透力强，可以使蛋白质变为不溶性，能保持细胞质的结构，同时适用于线粒体和高尔基体的固定。重铬酸钾固定的样本需使用流水冲洗12-24小时去除多余的药剂。

#### (6) 铬酸（H2CrO4）

作为强氧化剂和弱酸的铬酸呈红色或浅褐色结晶，因极易潮解，配制成1%的水溶液保存。其作为沉淀剂效果显著，但不应单独使用。铬酸的硬化程度适中，特别适合于肝糖的固定处理。固定后的组织需通过流水冲洗12小时以上以防沉淀影响染色。

#### (7) 氯化汞（HgCl2）

氯化汞亦称为升汞，呈白色针状结晶，极毒且具有腐蚀性，使用时需特别小心。其对所有蛋白质的沉淀效果显著，能够使蛋白质变性并不溶于水，通常与醋酸或甲醛合作使用。然而，它的穿透力较弱，收缩力较大。因此，经过氯化汞固定的样本需用5%的碘酒处理以去除沉淀物，并使用2%的硫代硫酸钠水溶液去碘。

#### (8) 锇酸（OsO4）

常称为锇酸，呈淡黄色结晶，强氧化剂，需避免与乙醇及甲醛混合使用。应使用洁净的容器配制1-2%的水溶液并避免光线曝晒。其为固定脂肪的最佳剂，具有缓慢的穿透速度，能够均匀固定蛋白质且保持细胞的生活形态。锇酸固定的组织切片在染色前需用漂白剂处理，以改变其上色难题。

综上所述，各种固定液具有不同的优缺点，例如，乙醇可以有效固定肝糖，却对脂肪固定能力不足，而锇酸则对脂肪固定效果极佳。了解不同固定液的特性和优劣，将为正确选用和合理应用提供重要指导。

### 2. 混合固定液的配制和性能

#### (1) 包音氏固定液

成分：呋喃酸饱和水溶液75ml、40%甲醛25ml、冰醋酸5ml。在使用前配制，包音氏液为常用的良好固定剂，适用范围广泛。其渗透力迅速且固定均匀，组织收缩较小。小型样本的固定时间为2-12小时，一般样本则为12-24小时，固定后需用50%酒精洗涤。使用此固定液可获得清晰的染色效果。

#### (2) 任克氏固定液

成分：重铬酸钾25g、氯化汞6g、蒸馏水100ml、冰醋酸5ml。其固定时间为12-24小时，完成后需用流水冲洗12小时，并进行去汞处理。

#### (3) 海利氏液

成分：重铬酸钾25g、氯化汞6g、蒸馏水100ml、40%甲醛5ml。适用于骨髓及脾等造血器官的固定，固定时间为12-24小时，固定后需去除汞沉淀。

#### (4) 苏萨氏液

成分：氯化汞45g、氯化钠0.5g、40%甲醛20ml、三氯醋酸2g、冰醋酸4ml、蒸馏水80ml。此液可软化较硬组织，适合皮肤及某些幼虫样本。

#### (5) 卡诺氏液

成分：纯酒精60ml、氯仿30ml、冰醋酸10ml。其穿透力极强，常用于细胞学制片。

#### (6) 酒精-甲醛液

成分：95%酒精90ml、40%甲醛10ml。可为中性，适合病理快速诊断的制片，特别是肥大细胞的固定。

总之，固定液的种类多样，根据实验目的和需求选择合适的固定液至关重要。在使用之前必须了解混合固定液的成分是否合适，并在必要时进行彻底冲洗。南宫28提供优质的生物医疗固定液，助力科研和临床诊断的开展。