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NEWS大鼠肺泡巨噬细胞NR8383培养指南 - 南宫28品牌
来源:武坚婉 日期:2025-02-21南宫28提供的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383培养说明书,旨在指导科研工作者合理有效地培养和管理细胞。本说明书涵盖了细胞的培养条件、处理方法和注意事项,以确保您在使用南宫28细胞时获得最佳的研究成果。
细胞名称:大鼠肺泡巨噬细胞NR8383
生长特性:贴壁悬浮混合生长
冻存条件:无血清冻存液(货号:C7001)
培养体系:F12K+20%FBS+1%P/S
传代方法:初次建议1:2传代,2天换液。对于悬浮细胞,使用离心收集,贴壁细胞请按贴壁培养方法处理。
收到南宫28细胞后,培养至良好状态,灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的最佳选择。用75%酒精喷洒整个细胞瓶进行消毒,并在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定其状态。显微镜观察细胞生长情况并记录不同倍数的照片(建议分别拍摄40x、100x、200x),前三天的照片为重要售后依据,如无照片则默认收到状态良好。
1. 如果细胞未超过80%汇合度,需将完全培养液收集至离心管,保留5ml继续培养;如果细胞密度超过80%,可进行传代。
2. 对于贴壁细胞:
1) 弃去上清,使用不含钙、镁的PBS清洗细胞1-2次。
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液,置37℃培养箱1-2分钟,并观察细胞状态,待细胞变圆脱落后加入完全培养基终止消化。
3) 吸出细胞悬液至15ml离心管,1000RPM离心5分钟,弃去上清液,重悬于1-2ml完全培养基中。
4) 按1:2比例分瓶传代,补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,放入37℃、5%CO2培养箱中培养。
3. 对于悬浮细胞:
方法一:收集细胞,1000RPM离心8-10分钟,弃上清液,重悬并分瓶。
方法二:可选择半数换液,将剩余细胞悬起分瓶。
1. 细胞覆盖培养瓶80%时,弃去培养液,并用PBS清洗;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液,观察细胞变化,终止消化后离心收集细胞;
3. 加入无血清冻存液并混匀,转移至冻存管中;
4. 将冻存细胞放入-80℃冰箱,转入液氮罐前需至少存放24小时。
1. 从液氮中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中解冻;
2. 将细胞移至15ml离心管中,进行离心,弃上清,重悬后接种至T25培养瓶;
3. 放置于37℃、5%CO2培养箱中,第二天更换新鲜培养基继续培养。
在运输过程中,部分细胞可能因不牢固贴壁而脱落,这属于正常现象。如脱落较多,可通过离心处理,重悬并按正常传代操作步骤执行。
1. 若细胞出现问题,需重发的情况包括细胞运输损坏、污染问题等,均需在收到后及时反馈并提供真实实验结果。
2. 不予重发的情况包括客户造成的污染、不当操作或培养条件不当等,视具体情况而定。
南宫28致力于为科研人员提供优质细胞资源和服务,确保您的研究高效顺利进行,如有进一步需求,欢迎随时与我们联系。
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